臨床生物化學/其它影響酶活性因素

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臨床生物化學

血清酶定量的檢測技術
- 酶活性測定條件的選擇和限定
  - 底物、輔因子、活化劑、變構劑的種類和濃度
  - 指示酶與輔助酶的種類和濃度
  - 反應體系的最適pH、緩沖液的種類和濃度
  - 其它影響酶活性因素
  - 溫度的控制

除了上述主要因素外，一些其它因素也會影響酶活性，如反應體系中含有氧化劑，可氧化酶蛋白中甲硫氨酸、色氨酸和酪氨酸殘基，使酶失活，試劑盒中常用的一些表面活性劑如Tween-80、Brig-35等會抑制一些酶的活性。

其它因素中，對酶測定而言，最重要的是抑制劑的作用，抑制作用是酶學中的一個重要研究內容。但如只涉及到設計和選擇測定酶的方法，則比較簡單，既然要測定的是“最適條件”下的最大反應速度，那么不論是可逆或不可逆抑制劑，也不論是競爭性、非競爭性、反競爭性抑制劑都應在反應體系中設法除去。此問題在測定尿液中尤為突出。尿中排出大量代謝產物，不少物質會影響酶，如脲可使酶解聚、磷酸鹽抑制磷酸酶活性。在病理情況下尤其使用各種藥物后，使情況更為復雜，此時尿中可出現不少正常情況下不出現物質，即可能抑制酶活性，也可能激活酶活性。為使脲酶測定結果有一定可比性，最好在測定脲酶前，通過透析、凝膠層析或超濾將小分子化合物與酶分開，這樣較為可靠。