臨床生物化學/其它方法

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臨床生物化學

血清酶定量的檢測技術
- 酶活性測定的常用技術和方法
  - 量氣法
  - 比色法與分光亮度法
  - 熒光法和同位素法
  - 其它方法

離子選擇電極法，旋光法等有時用于測定特定的酶，當酶反應牽涉到有酸堿變化時，很容易用pH儀直接觀察酶反應過程中H⁺的變化。直接用pH儀測酶反應有兩個缺點：一是隨pH變化，會偏離酶作用的最適pH值，不可避免地引起酶反應速度變慢。其二是如測定的標本不是純酶時標本中其他蛋白及其它有緩衡能力的物質將會影響所測pH變化的程度。此時如改用電位滴定儀則更為適合。此儀器可在酶反應過程中不斷向反應體系中加入酸或堿以維持反應體系pH的恒定，而加入的酸堿量只與體系中H⁺變化量相關，和反應體系中緩衡能力無關。

同樣如酶反應中有O₂變化，可使用氧電極來監測酶反應過程，這可用來測定葡萄糖氧化酶活性，Chappell還成功地將此技術用于測線粒體的氧化能力。還曾有人嘗試用二氧化碳和氨電極測酶，由于這些電極反應時間較慢，不利于檢測酶反應速度。有些酶的反應物為光學異構體，則可根據旋光度變化來追蹤酶反應。某些反應物如羥基酸本身雖無旋光性，但與鉬結合后產生很高的旋光性。根據此特性建立了測定延胡索酸水合酶的方法。還有個別酶的測定使用了極譜法、高效液相色譜法等。總之，實驗室工作者完全可以根據實驗室現有儀器和技術，創造性地建立一些新的測活性濃度的方法。