混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)
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混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)(MLC)或稱混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)(MLR)常用于器官移植前的組織配型,以測定受體和供體主要組織相容性抗原(HLA抗原)相容的程度。由于MLC中淋巴細(xì)胞接受同種異型抗原的刺激而發(fā)生活化、增殖,產(chǎn)生種類眾多的細(xì)胞因子,促進(jìn)NK、LAK和CTL等殺傷細(xì)胞的分化,因此又是免疫調(diào)節(jié)研究中常用的實(shí)驗(yàn)?zāi)P汀?/p>
兩個(gè)無關(guān)個(gè)體功能正常的淋巴細(xì)胞在體外混合培養(yǎng)時(shí),由于HLAⅡ類抗原中D和DP抗原不同,可相互刺激對方的T細(xì)胞發(fā)生增殖,此為雙向混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)(two way MLC);若將其中一方的淋巴細(xì)胞先用絲裂霉素C(mytomycine C)處理或射線照射使之細(xì)胞中DNA失去復(fù)制能力,但仍能刺激另一方淋巴細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)化,稱為單向混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)(one way MLC)。兩個(gè)個(gè)體間HLA抗原差異程度越大,反應(yīng)越強(qiáng)烈,可通過細(xì)胞數(shù)量、形態(tài)檢查或3H-TdR摻入率檢測反應(yīng)細(xì)胞的增殖水平。如用經(jīng)照射的、已知D位點(diǎn)抗原的純合子分型細(xì)胞(Homozygous typing cell,HTC)作為刺激細(xì)胞,則可檢測待檢者的D位點(diǎn)抗原型別。若待檢者抗原與標(biāo)準(zhǔn)HLA-D抗原相同,MLC不發(fā)生增殖,此為HLA-D抗原陰性分型法。EB病毒轉(zhuǎn)化的B淋巴母細(xì)胞表達(dá)高水平的HLAⅡ類抗原,常作為單向混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)中的刺激細(xì)胞。
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