病原體的檢查、培養(yǎng)和分離
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病原體的檢查、培養(yǎng)和分離(examination，culture and isolation of pathogen)，傳染病由各種病原體引起，在病人體內(nèi)及其排泄物中找到病原體，對傳染病的診斷及治療具有重要意義。特別是早期診斷意義更大，因?yàn)樵诓〕淘缙?，病人體內(nèi)的病原體多，檢測的陽性率高，病程后期，人體產(chǎn)生免疫力，病原體被消滅，檢測的陽性率降低。但要注意標(biāo)本來源不同，病原體陽性的診斷意義也不同。如從發(fā)熱病人血中培養(yǎng)出傷寒桿菌，即可確診傷寒；而從其糞便中培養(yǎng)出傷寒桿菌就不可能百分之百地肯定為傷寒，因?yàn)閭畻U菌的攜帶者也可由其他疾病而引起發(fā)熱。此外，病原體檢測對指導(dǎo)治療也非常重要，可以根據(jù)檢測結(jié)果選用適當(dāng)?shù)乃幬镏委?，尤其是培養(yǎng)陽性者，藥物敏感試驗(yàn)可指導(dǎo)醫(yī)生選用有效藥物。檢測病原體的方法包括直接檢查、培養(yǎng)和分離。
直接檢查
簡單易行、快速、準(zhǔn)確?？蓪?biāo)本制成涂片，染色（或不染色）后，直接在顯微鏡下檢查病原體。但只有在病原體較大時(shí)才能用普通光學(xué)顯微鏡查到，如病毒太小，普通顯微鏡看不到，不能用這種檢查方法。有些病原體即使在普通顯微鏡下能見到，但單純從形態(tài)上很難與其他微生物相鑒別，必須用特殊染色方法，如白喉?xiàng)U菌與類白喉?xiàng)U菌只有用特殊染色（龐德氏染色等）才能區(qū)別。引起猩紅熱的乙型溶血性鏈球菌在形態(tài)上無法與其他鏈球菌鑒別，而又無特殊染色，因此不能用直接檢查法進(jìn)行檢查。免疫熒光檢查就是一種特殊染色法，原理是將特異性抗體標(biāo)記熒光素，涂片上若有相應(yīng)的病原體，帶熒光素的特異性抗體就與之結(jié)合，在熒光顯微鏡下便可以看到發(fā)黃綠色熒光的病原體。應(yīng)用免疫染色法檢查糞便中的痢疾桿菌，可將其與大腸桿菌鑒別，這也是一種直接檢查法。
培養(yǎng)和分離
雖較直接檢查法為慢，且較為復(fù)雜，但更準(zhǔn)確，應(yīng)用范圍也更廣，幾乎可用于所有的病原體。一般除病毒、衣原體和立克次氏體外，都可用無生命的培養(yǎng)基培養(yǎng)和分離。培養(yǎng)基的種類很多，可根據(jù)不同的病原體加以選用。培養(yǎng)分離病原體后，還可進(jìn)行各種試驗(yàn)，如發(fā)酵試驗(yàn)、毒力試驗(yàn)等，這對病原體的進(jìn)一步鑒定非常重要。病毒、衣原體和立克次氏體缺乏維持生命所必須的各種酶，不能像細(xì)菌那樣從培養(yǎng)基中攝取營養(yǎng)物質(zhì)，利用自己的酶來合成自己所需的各種成分，不能用無生命的培養(yǎng)基培養(yǎng)，而必須接種到有生命的機(jī)體內(nèi)，利用機(jī)體的酶來合成它們所需的各種成分。這種方法稱“病毒分離”、“衣原體分離”或“立克次氏體分離”。分離的方法一般有三種：①組織培養(yǎng)。最簡單常用；②動物胚胎（如雞胚、鴨胚）接種；③動物接種，如接種小白鼠、豚鼠等。不同的病毒、衣原體或立克次氏體常需要不同的分離方法，分離陽性后也常需進(jìn)行各種試驗(yàn)（如血清學(xué)試驗(yàn)等）才能最后判定其種類。病原體的直接檢查常與病原體的培養(yǎng)分離同時(shí)進(jìn)行。
除上述兩種方法外，還有一些特殊的檢查方法。例如對懷疑為狂犬病的人或動物可取其腦組織檢查特異性包涵體（內(nèi)格里氏小體）確診；檢查乙型肝炎表面抗原可用反向被動血凝法(RPHA)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)及放射免疫試驗(yàn)(RIA)等方法;檢查糞便中的甲型肝炎病毒可用免疫電鏡等。還可應(yīng)用分子雜交或核酸分析的方法來檢驗(yàn)病人血液、組織或排泄物中的病原體核酸以協(xié)助診斷，如血液中及肝組織中的乙型肝炎病毒核酸，就可用分子雜交的方法檢測；糞便中的輪狀病毒可用核酸分析的方法來檢測等。由于病原體的各種抗原和病原體的核酸都是病原體的特異性成分，因此如果它們出現(xiàn)陽性也就表示病原體陽性，故這些方法也具有很大的確定診斷的意義。
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