組織學/組織培養術

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組織學

組織學緒論
- 組織學研究方法
  - 一般光學顯微鏡術
  - 幾種特殊顯微鏡的應用
  - 組織化學和細胞化學術
  - 免疫細胞化學術
  - 同位素示蹤術
  - 原位雜交術
  - 細胞和細胞化學定量術
  - 電子顯微鏡術
  - 組織培養術
  - 細胞融合術

前述幾種方法都是取人體或在體（in vivo）實驗動物的組織，經固定等處理后，對已死亡的組織進行觀察研究的。組織培養(tissue culture)或稱體外實驗（in vitro）則是取活組織或活細胞在體外適宜的環境中培養成活，進行實驗研究。細胞在體外生存必須具有近似體內的生存條件，如充足營養供應，合理的O₂與CO₂比例，必要的電解質和適宜的滲透壓，pH值、溫度和濕度等，還需防止微生物污染。組織培養的特點在于可用研究各種理化因子（溫度、激素、藥物、毒物等）對活細胞的直接影響，并能觀察記錄（攝影、錄像）。組織培養與前述方法結合應用，可研究某種因素對細胞增殖、分化、代謝、運動、吞噬、分泌等影響和調節的動態過程，以及細胞病變、癌變和逆轉等機理，獲得在體實驗難達到的研究目的。

組織培養用液為平衡鹽水及血清（小牛血清、胎盤血清等），羊水、腹水、組織浸出液等天然培養基(natural medium)。天然培養基成分復雜，且不穩定。目前廣泛應用人工合成培養基（synthetic medium）現有多種商品供應，使用方便，但常仍需補充部分血清等。若僅用合成培養基和已制備好的幾種必須因子與激素，稱此為無血清培養基（serum-free medium），其成分和含量均是已知的，可精細研究某種因子對細胞的生物效應。

組織培養的方法甚多，常用容器有凹玻片、培養皿、培養瓶、培養板、流動小室等。取組織塊貼于瓶底進行培養，可觀察從組織塊生長遷移出的細胞。取胚胎某器官原基或器官的一部分進行培養，稱器官培養（organ culture）。更精細的方法是分離和純化組織中的某種細胞，使之貼附在瓶底形成單層細胞（圖1－18），稱此為細胞培養（cell culture）。首次培養的細胞，稱原代培養（primary cultrue；細胞增殖而密集再傳代培養，稱傳代培養（subculture）。經長期培養而成的細胞群體，稱細胞系（cell line）；用細胞克隆（cell clone）或單細胞培養而建成的某種純細胞群體，稱細胞株（cell strain）。它們均可在液氮內長期凍存，供隨時應用。現已建成多種腫瘤細胞株，廣泛用于實驗研究。